Thèse dirigée par Éric Guédon, directeur de recherche INRAE, UMR « Science et Technologie du Lait et de l'Œuf » (STLO)

Spécialité : Biologie, Biologie moléculaire et cellulaire

Résumé

S. aureus est un pathogène important de l’homme et l’animal, responsable de diverses infections avec des manifestations cliniques parfois graves. La découverte des vésicules extracellulaires produites par S. aureus (SaVE) ouvre de nouvelles perspectives pour l’étude de la virulence de ce pathogène. Leur rôle dans les relations hôte-pathogène n’est pas encore totalement compris, particulièrement l’implication des molécules ARNs qu’elles transportent. Notre objectif est de caractériser le mode d'action des SaVE sur les cellules humaines de type ostéoblaste MG-63 et de comprendre comment elles influencent la réponse immunitaire. Nous avons montré que SaVE de la souche N315 activent l’expression de nombreux gènes de l’immunité chez les cellules MG-63 incluant ceux codants les cytokines pro-inflammatoires, les acteurs de la voie NF-kB et les récepteurs spécifiques PRRs (Pattern Recognition Receptors).
Cependant, cette activation de l’expression des PRRs ne semble pas être directement le reflet de l’interaction entre le ligand associé aux SaVE et le dit récepteur. Les SaVE sont internalisées dans les cellules MG-63 de manière temps et dose dépendant par un mécanisme d’endocytose médiée par la dynamine. Notre étude a permis de mettre en évidence la livraison du cargo ARNs des SaVE dans ces cellules et d’en suivre le devenir. Ces ARNs intravésiculaires transfectés dans les cellules cibles entrainent une diminution de l’abondance de nombreuses protéines de l’inflammation. Certains ARNs des SaVE possèdent des séquences similaires ou complémentaires aux miARNs eucaryotes et ont été identifiés dans cette étude comme de sérieux candidats pour la modulation des gènes de l’hôte.

Mots clés : Interaction, Vésicules membranaires, Staphylococcus aureus, Internalisation, Signalisation, ARNs